1. 产品概述
本产品为使用大肠杆菌 DH5α 菌株制备的高效化学感受态细胞,转化效率可达 108 cfu/μg DNA, 被广泛用于质粒转化、基因克隆等;可以使用蓝白斑筛选。
2. 产品组分
| 组分 | CC1401-01 |
| DH5α化学感受态细胞 | 10×100 μL |
基因型:F - φ80lacZΔM15 Δ(lacZYA-argF) U169 recA1 endA1 hsdR17(rk - , mk + ) phoA supE44 thi-1 gyrA96 relA1 λ-
3. 保存条件
-80℃保存至少 6 个月,请勿将本品置于-20℃或者液氮中保存。干冰运输。
4. 适用场景
本产品适用于质粒转化、基因克隆等、蓝白斑筛选。
5. 使用方法
1. 将感受态细胞从-80℃中取出,置于冰水浴中融化;
2. 将待转化 DNA 加入到 100 μL 感受态细胞中,轻轻弹匀,冰上静置孵育 30 min;
3. 将离心管置于 42℃水浴锅中,不要晃动,热激 90 s 后,立刻置于冰水浴中静置 2-3 min;
4. 向离心管中加入 900 μL LB 或 SOC 培养基(室温或 37℃预热),然后置于37℃摇床复壮 45 min;
5. 取不同体积的转化产物,用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上,于37℃培养箱培养过夜。
6. 注意事项
1. 该菌株的重组率较低,故常用于克隆质粒的保存。
2. 蓝白斑筛选时,需在平板上预先涂布 IPTG 和 X-gal。
3. 属于 E. coli K12 系列,可用于基因克隆等;不可用于以T7 RNA 聚合酶为表达系统的蛋白表达。
4. 感受态细胞冰水浴中解冻后应立即使用。
5. 加入的待转化 DNA 的总体积不应超过感受态细胞体积的 1/10。
6. 加入待转化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受态细胞,仅用手指轻弹即可。
7. 为确保最高转化效率,整个操作过程中除热激外均要保持低温, 并且要尽量轻柔。
8. 本产品仅作科研用途。
9. 为了您的安全和健康,实验时请穿实验服并戴一次性手套操作。

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