1. 产品概述
TOP10 菌株来源于 MC1061 菌株，其生长速度较快(比 DH5α 快，但比 Mach1-T1 慢)，约 10 小时可见克隆。基因型与 DH10B 高度类似(DH10B 为 galE15 型，而 TOP10 为 galU 型)，hsdR 用于有效转化通过 PCR 扩增获得的未甲基化 DNA；lacZΔM15 的表达使 TOP10 感受态可用于蓝、白斑筛选；recA1 可减少插入片段的同源重组概率，保证了插入 DNA 的稳定性；endA1 的突变提高了质粒DNA 的产量和质量；StrR 使得该菌株具有链霉素抗性。经pUC19 质粒转化检测，转化效率可达108cfu/μgDNA 以上。
2. 产品组分
| 组分 | CC1404-01 |
| TOP10 化学感受态细胞 | 10×100μL |
基因型：F - mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC) φ80 lacZΔM15 ΔlacX74 recA1 araD139 Δ(ara-leu)7697 galU galK rpsL (StrR)endA1 nupG
3. 保存条件
-80℃保存至少 6 个月，请勿将本品置于-20℃或者液氮中保存。干冰运输。
4. 适用场景
本产品适用于基因克隆、蓝白筛选、质粒稳定扩增等分子生物学实验。
5. 使用方法
1. 从-80℃取感受态细胞，放置在冰浴或冰水浴中融化，约 5-10 min，放置时间过长会影响转化效率；
2. 每 100 μL 感受态加入待转化 DNA 样品约 10 μL，然后轻轻弹击管底约 2-3 次，立即冰上静置孵育 30 min；加入待转化 DNA 样品后应轻柔操作，避免使用移液枪吹打混匀。
3. 将冰浴后的离心管快速置于 42℃水浴中，静置热激 90 s。随后立即转移至冰水浴中静置 2-3 min 以 快速冷却。热激及转移至冰浴过程中请勿晃动离心管。
4. 加入 900 μL37℃预热的 LB 或 SOC 培养基，颠倒数次混匀，37℃摇床约 220 rpm 复苏培养 45 min。
5. 如果用于质粒的转化扩增，建议直接取 50-100μL 进行涂板即可；如果用于连接产物或重组产物的转化，建议先 5000 g，1 min 室温离心沉淀细菌，吸除约 900-950 μL 上清，然后用剩余的约 50-100 μL 菌液重悬，涂布到含相应抗生素的 LB 平板上。
6. 将平板倒置放于 37℃培养箱培养过夜。将平板稍微晾至无明显水渍，有利于形成单克隆。
6. 注意事项
1. 感受态细胞冰浴中解冻后应立即使用。
2. 加入的待转化 DNA 的总体积不应超过感受态细胞体积的 1/10。
3. 为确保更高转化效率，整个操作过程中除热激外均要保持低温，并且要尽量轻柔。
4. 本产品仅作科研用途。为了您的安全和健康，实验时请穿实验服并戴一次性手套操作。
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